Nghiên cứu nuôi tạo tấm biểu mô từ tế bào gốc biểu mô niêm mạc miệng

Abstract

THÔNG TIN TÓM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI CỦA LUẬN ÁN TIẾN SĨ. Tên đề tài luận án: “Nghiên cứu nuôi tạo tấm biểu mô từ tế bào gốc biểu mô niêm mạc miệng”. Chuyên ngành: Mô phôi thai học, Mã số: 62720103. Nghiên cứu sinh: Đào Thị Thúy Phượng. Thầy hướng dẫn: PGS.TS. Nguyễn Thị Bình. Cơ sở đào tạo: Trường Đại học Y Hà Nội. Những kết luận mới của luận án:. 1. Đã tìm ra được phương pháp nuôi tạo tấm biểu mô niêm mạc miệng hoàn toàn mới đó là sử dụng mảnh biểu mô và lớp tế bào đồng nuôi cấy là nguyên bào sợi tự thân. Trên thực nghiệm, ở giai đoạn đầu quá trình nghiên cứu, phương pháp này cho tỷ lệ nuôi tạo thành công cao hơn phương pháp mảnh mô và thấp hơn phương pháp dịch treo nhưng sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê. Ở giai đoạn 2, chúng tôi đã nuôi 30 mẫu trên thỏ với tỷ lệ nuôi tạo thành công là 100%. Phương pháp mới này đơn giản, hiệu quả, khắc phục được nhược điểm và tận dụng được ưu điểm của cả hai phương pháp nuôi cấy hiện đang sử dụng trên thế giới. Nguyên bào sợi tự thân được sử dụng thay thế cho 3T3 là loại tế bào có nguồn gốc từ chuột. Áp dụng phương pháp này để nuôi tạo tấm biểu mô từ tế bào gốc biểu mô niêm mạc miệng trên người, tỷ lệ thành công là 90%.. 2. Sử dụng nhiều phương pháp khác nhau để định danh các tế bào của tấm biểu mô nuôi cấy. Kết quả: các tế bào của tấm biểu mô nuôi cấy có cấu trúc hình thái và hóa học giống với biểu mô trước giác mạc.. 3. Ghép các tấm biểu mô bằng phương pháp này cho 15 mắt thỏ bị suy giảm tế bào gốc vùng rìa giác mạc toàn bộ, 60 ngày sau ghép giác mạc thỏ trong và tấm biểu mô dính sát vào lớp chân bì. 17 bệnh nhân được ghép tấm biểu mô có 9 bệnh nhân cải thiện thị lực, số còn lại không còn hiện tượng tăng sinh xơ mạch vào giác mạc.. THẦY HƯỚNG DẪN NGHIÊN CỨU SINH. PGS.TS. NGUYỄN THỊ BÌNH ĐÀO THỊ THÚY PHƯỢNG

SUMMARY OF DOCTORAL THESIS’S NEW CONCLUSIONS. Topic: “Research to create the cultured oral epithelial cells sheet from oral epithelial stem cells”. Code: 62720103 Specialty: Histology and Embryology. Fellow: Dao Thi Thuy Phuong. Supervisor: Associate Professor Nguyen Thi Binh, MD., PhD.. Institution: Hanoi Medical University. New conclusions of the thesis:. 1. Find out the completely new method to create the cultured oral mucosal epithelial sheet: using epithelial fragment only and co-cultured with autologous fibroblasts. In phase 1 of experimental period, the proportion of successful creation of cultured epithelial sheet of epithelial fragment method were higher than explant, and lower than suspension method but the difference were not significant. In phase 2: We have adopted 30 samples by the epithelial fragment method, the success growth rate is 100%. This new method is simple, effective and has many advatantages over and take full of pros of current methods in the world. Autologous fibroblasts were co-cultured instead of mouse 3T3 (animal derived product). On human, the success growth rate was 90% when using this new finding method.. 2. Using many different methods to characterize the cells of cultured epithelial sheets, the results showed that the morphological and chemical characteristics of the cultured cells are similar to corneal epithelial cells. 3. Fifteen cultured oral epithelial sheets created by our new method were transplanted for 15 eyes of 15 rabbits with total LSCD in one eye, clear corneal surfaces were observed and the grafts were firmly attached to the underlying connective tissue after 60 days of transplantation. After grafting, among 17 total limbal stem cell deficiency patients, the visual acuity was improved in 9 patients, no fibrovascular tissue invasion was found on the corneal surface in the rest.. SUPERVISOR FELLOW. Ass. Prof. Nguyen Thi Binh Đao Thi Thuy Phuong.