KHẢO SÁT SỰ BIỂU HIỆN mRNA CỦA GEN SPAG8 TRÊN BỆNH NHÂN VÔ SINH NAM

Abstract

Sự điều hòa quá trình sinh trưởng và biệt hóa tinh trùng ở nam giới do nhiều gen quy định. Gen SPAG8 là một trong những gen tham gia vào quá trình đó mà vai trò của nó còn chưa được minh chứng rõ ràng. Mục tiêu: Hoàn thiện quy trình kỹ thuật qPCR (quantitative polymerase chain reaction) để đánh giá mức độ biểu hiện mRNA của gen SPAG8 ở nam giới vô sinh. Đối tượng và phương pháp: 50 mẫu máu ngoại vi (25 mẫu của bệnh nhân vô sinh nam, 25 mẫu của nhóm chứng). Sử dụng kỹ thuật qPCR để khảo sát biểu hiện mRNA của gen SPAG8 từ các mẫu bệnh phẩm kể trên. Kết quả: 100% mẫu mRNA được tách chiết thành công từ máu ngoại vi với độ tinh sạch đạt chuẩn. 100% cDNA được tổng hợp thành công từ mRNA bằng quá trình sao mã ngược. Chất lượng cDNA được kiểm chứng bằng hình ảnh điện di trên thạch agarose sau phản ứng PCR khuếch đại đoạn gen GAPDH. Kết luận: Hoàn thiện thành công quy trình kỹ thuật qPCR với nhiều giai đoạn khác nhau, mỗi giai đoạn đều có các tiêu chuẩn để đối chứng, đảm bảo cho quy trình được thành công và kết quả phân tích được rõ ràng và cho phép đánh giá mức độ biểu hiện mRNA của gen SPAG8 trên đối tượng nam giới vô sinh.