Nghiên cứu sản xuất các gam chuẩn cho RT-PCR, ứng dụng trong chẩn đoán cúm và kiểm định công hiệu vắc xin sởi

Abstract

THÔNG TIN TÓM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI . CỦA LUẬN ÁN TIẾN SĨ. Những kết luận mới của luận án:. Nghiên cứu đã sản xuất tại Việt Nam hàng loạt chứng dương ARN với sản lượng cao (1011-1019 bản sao/phản ứng 20µl) bằng cả hai kỹ thuật cổ điển và trực tiếp; Nghiên cứu đã đưa ra được tỷ lệ phát hiện cúm mùa và cúm A/H1N1pdm09 ở bệnh nhân viêm đường hô hấp cấp tính nặng, nhập viện tại Hải Dương 2009-2011. Kết quả của nghiên cứu cho thấy virus cúm mùa A (A/H3N2 và A/H1N1), cúm B, cúm A/H1N1pdm09 chiếm tương ứng 1,9%, 6,4%, và 10,4%. Tỷ lệ đồng nhiễm chiếm 11,3%, trong đó có đồng nhiễm giữa các virus cúm. Nhóm tuổi nhiễm virus cúm mùa A và cúm B chủ yếu là 1-5 tuổi, cúm A/H1N1pdm09 là 6-18 tuổi. Dường như không có sự khác biệt về giới tính. Nghiên cứu đã xây dựng và tiền thẩm định phương pháp mới xác định công hiệu vắc xin sởi đơn, sống giảm độc lực bằng định lượng trực tiếp ARN bên trong tế bào gây nhiễm bằng real-time RT-PCR. Kỹ thuật mới nhanh (24 giờ), chính xác, tự động hóa và tương quan chặt chẽ với kỹ thuật chuẩn vàng là tạo đám hoại tử..

NEW CONCLUSIONS OF THE THESIS. New conclusions of the thesis:High yield RNA (1011-1019 copies/20μl reaction) has been prepared in Vietnam by both conventional and direct in vitro transcription; Detection of seasonal influenza and influenza A/H1N1pdm09 among hospitalized severe acute respiratory infection (SARI) patients in Hai Duong during 2009-2011 has been conducted. The results showed that the seasonal influenza A (A/H3N2 and A/H1N1), influenza B, influenza A/H1N1pdm09 accounted for 1.9%, 6.4%, and 10.4%, respectively. The co-infection was 11.3%, including co-infection among influenza viruses. The age group infected with seasonal influenza A and influenza B were mostly 1-5 ​​years old, while the one infected most with A/H1N1pdm09 was 6-18 years old. There seemed to be no different distribution by gender; A new assay testing the potency of single and live-attenuated measles vaccine by quantification of RNA within infected cells by real-time RT-PCR has been set up and pre-validated. The new assay was rapid (24 hours), precise, automated and strongly correlated with the gold technique of plaque forming assay..